液質(zhì)聯(lián)用儀是一種結(jié)合液相色譜（LC）和質(zhì)譜（MS）技術(shù)的分析設(shè)備，主要用于復(fù)雜樣品的分離與檢測(cè)。其工作原理是通過(guò)液相色譜系統(tǒng)分離樣品組分，再由質(zhì)譜系統(tǒng)進(jìn)行高靈敏度分析。液相色譜部分負(fù)責(zé)樣品分離，常用超高效液相色譜提升效率；質(zhì)譜系統(tǒng)則包括離子源（如ESI、APCI）、質(zhì)量分析器（如三重四極桿、Orbitrap）和檢測(cè)器。

　　該儀器具有高分辨率、多模式分析能力，支持痕量物質(zhì)檢測(cè)，靈敏度可達(dá)痕量級(jí)（pg水平）。其優(yōu)勢(shì)在于高靈敏度、強(qiáng)抗干擾能力和高通量分析，能夠動(dòng)態(tài)同步監(jiān)測(cè)多組分。液質(zhì)聯(lián)用儀在藥物研發(fā)、環(huán)境檢測(cè)、食品安全、臨床藥理學(xué)研究、天然藥物開發(fā)、殘留分析、毒物分析以及蛋白與肽類鑒定等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。例如，在藥物代謝研究中，它能精確監(jiān)測(cè)藥物體內(nèi)過(guò)程；在環(huán)境分析中，可檢測(cè)水樣中痕量污染物。

　　液質(zhì)聯(lián)用儀的操作步驟：

　　一、開機(jī)前準(zhǔn)備

　　環(huán)境檢查

　　確保實(shí)驗(yàn)室溫度（通常18~25℃）、濕度（40%~60%）和電源符合儀器要求。

　　檢查氮?dú)狻鍤獾葰怏w供應(yīng)壓力（如氮?dú)獍l(fā)生器、氬氣鋼瓶），確保壓力穩(wěn)定（如小表<0.1MPa）。

　　儀器狀態(tài)確認(rèn)

　　檢查液相色譜系統(tǒng)（泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱）和質(zhì)譜系統(tǒng)（離子源、檢測(cè)器）是否正常，無(wú)漏液或污染。

　　清潔噴霧電極、色譜柱等關(guān)鍵部件，避免交叉污染。

　　二、開機(jī)與系統(tǒng)初始化

　　開啟設(shè)備順序

　　打開氮?dú)獍l(fā)生器、氬氣鋼瓶→啟動(dòng)計(jì)算機(jī)→打開UPLC自動(dòng)進(jìn)樣器電源→打開UPLC泵電源→最后打開質(zhì)譜儀電源。

　　等待質(zhì)譜儀預(yù)熱（約5分鐘），直至離子源透視鏡亮起。

　　軟件啟動(dòng)與真空檢查

　　啟動(dòng)控制軟件（如Masslynx），進(jìn)入診斷模式（Diagnostics），檢查真空系統(tǒng)狀態(tài)。

　　碰撞室真空度需在4小時(shí)內(nèi)達(dá)到理想值（如80%以上），否則需延長(zhǎng)抽真空時(shí)間。

　　三、方法建立與參數(shù)設(shè)置

　　色譜條件設(shè)置

　　流動(dòng)相配置：選擇合適溶劑（如水、甲醇、乙腈），使用0.45μm過(guò)濾器過(guò)濾并脫氣（超聲或在線脫氣）。

　　色譜柱安裝：根據(jù)樣品特性選擇C18、HILIC等色譜柱，設(shè)定流速（如0.2~1mL/min）、柱溫（30~40℃）及梯度洗脫程序。

　　質(zhì)譜條件優(yōu)化

　　離子源選擇：根據(jù)樣品極性選擇電噴霧電離（ESI）或大氣壓化學(xué)電離（APCI）源，調(diào)整源溫度、電壓等參數(shù)。

　　校準(zhǔn)與調(diào)諧：使用標(biāo)準(zhǔn)品（如多肽混合物）進(jìn)行質(zhì)譜校準(zhǔn)，確保質(zhì)量精度（如偏差<0.1Da）。

　　掃描模式：根據(jù)需求選擇全掃描（Full Scan）、選擇性離子監(jiān)測(cè)（SIM）或多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式。

　　四、樣品處理與進(jìn)樣

　　樣品前處理

　　固體樣品需提取、濃縮，液體樣品需過(guò)濾（如0.22μm濾膜）或稀釋，確保與流動(dòng)相兼容。

　　避免引入顆粒物或雜質(zhì)，防止堵塞色譜柱或污染離子源。

　　進(jìn)樣操作

　　使用自動(dòng)進(jìn)樣器或手動(dòng)注射，確保進(jìn)樣量準(zhǔn)確（如1~100μL）。

　　編制樣品表（Sequence），設(shè)置空白、標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品及待測(cè)樣品的進(jìn)樣順序。

　　五、數(shù)據(jù)采集與監(jiān)控

　　啟動(dòng)運(yùn)行

　　開始色譜分離與質(zhì)譜檢測(cè)，實(shí)時(shí)監(jiān)控色譜圖和質(zhì)譜圖，檢查峰形、信號(hào)強(qiáng)度及噪音水平。

　　若出現(xiàn)異常（如峰分裂、信號(hào)漂移），需暫停運(yùn)行并檢查流動(dòng)相、離子源或柱狀態(tài)。

　　數(shù)據(jù)存儲(chǔ)

　　保存原始數(shù)據(jù)文件（如.RAW或.MS格式），確保實(shí)驗(yàn)可追溯性。

　　六、數(shù)據(jù)分析與報(bào)告

　　色譜數(shù)據(jù)處理

　　根據(jù)保留時(shí)間、峰面積或峰高定量目標(biāo)化合物，使用內(nèi)標(biāo)法或外標(biāo)法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　質(zhì)譜數(shù)據(jù)解析

　　通過(guò)分子離子峰（[M]+或[M]-）和碎片離子峰進(jìn)行定性分析，結(jié)合數(shù)據(jù)庫(kù)（如NIST、HMDB）或文獻(xiàn)比對(duì)。

　　計(jì)算質(zhì)量準(zhǔn)確度（如誤差<5ppm）以驗(yàn)證結(jié)果可靠性。

　　報(bào)告生成

　　整理樣品信息、實(shí)驗(yàn)條件、定量結(jié)果及誤差分析，生成PDF或Word報(bào)告并存檔。

　　七、關(guān)機(jī)與維護(hù)

　　清洗系統(tǒng)

　　運(yùn)行沖洗程序（如甲醇-水混合液），清洗色譜柱和流路，防止鹽或殘留物沉淀。

　　每周至少更換一次廢液瓶，清潔噴霧電極和離子源。

　　關(guān)機(jī)順序

　　先關(guān)閉質(zhì)譜儀電源，再關(guān)閉UPLC泵和自動(dòng)進(jìn)樣器，最后關(guān)閉計(jì)算機(jī)和氣體供應(yīng)。

　　若長(zhǎng)期停機(jī)（超過(guò)一周），需保持質(zhì)譜真空狀態(tài)，避免微生物污染。