液質聯用儀是一種結合液相色譜（LC）和質譜（MS）技術的分析設備，主要用于復雜樣品的分離與檢測。其工作原理是通過液相色譜系統分離樣品組分，再由質譜系統進行高靈敏度分析。液相色譜部分負責樣品分離，常用超高效液相色譜提升效率；質譜系統則包括離子源（如ESI、APCI）、質量分析器（如三重四極桿、Orbitrap）和檢測器。
該儀器具有高分辨率、多模式分析能力，支持痕量物質檢測，靈敏度可達痕量級（pg水平）。其優勢在于高靈敏度、強抗干擾能力和高通量分析，能夠動態同步監測多組分。液質聯用儀在藥物研發、環境檢測、食品安全、臨床藥理學研究、天然藥物開發、殘留分析、毒物分析以及蛋白與肽類鑒定等領域應用廣泛。例如，在藥物代謝研究中，它能精確監測藥物體內過程；在環境分析中，可檢測水樣中痕量污染物。
一、開機前準備
環境檢查
確保實驗室溫度（通常18~25℃）、濕度（40%~60%）和電源符合儀器要求。
檢查氮氣、氬氣等氣體供應壓力（如氮氣發生器、氬氣鋼瓶），確保壓力穩定（如小表<0.1MPa）。
儀器狀態確認
檢查液相色譜系統（泵、自動進樣器、柱溫箱）和質譜系統（離子源、檢測器）是否正常，無漏液或污染。
清潔噴霧電極、色譜柱等關鍵部件，避免交叉污染。
二、開機與系統初始化
開啟設備順序
打開氮氣發生器、氬氣鋼瓶→啟動計算機→打開UPLC自動進樣器電源→打開UPLC泵電源→最后打開質譜儀電源。
等待質譜儀預熱（約5分鐘），直至離子源透視鏡亮起。
軟件啟動與真空檢查
啟動控制軟件（如Masslynx），進入診斷模式（Diagnostics），檢查真空系統狀態。
碰撞室真空度需在4小時內達到理想值（如80%以上），否則需延長抽真空時間。
三、方法建立與參數設置
色譜條件設置
流動相配置：選擇合適溶劑（如水、甲醇、乙腈），使用0.45μm過濾器過濾并脫氣（超聲或在線脫氣）。
色譜柱安裝：根據樣品特性選擇C18、HILIC等色譜柱，設定流速（如0.2~1mL/min）、柱溫（30~40℃）及梯度洗脫程序。
質譜條件優化
離子源選擇：根據樣品極性選擇電噴霧電離（ESI）或大氣壓化學電離（APCI）源，調整源溫度、電壓等參數。
校準與調諧：使用標準品（如多肽混合物）進行質譜校準，確保質量精度（如偏差<0.1Da）。
掃描模式：根據需求選擇全掃描（Full Scan）、選擇性離子監測（SIM）或多反應監測（MRM）模式。
四、樣品處理與進樣
樣品前處理
固體樣品需提取、濃縮，液體樣品需過濾（如0.22μm濾膜）或稀釋，確保與流動相兼容。
避免引入顆粒物或雜質，防止堵塞色譜柱或污染離子源。
進樣操作
使用自動進樣器或手動注射，確保進樣量準確（如1~100μL）。
編制樣品表（Sequence），設置空白、標準曲線樣品及待測樣品的進樣順序。
五、數據采集與監控
啟動運行
開始色譜分離與質譜檢測，實時監控色譜圖和質譜圖，檢查峰形、信號強度及噪音水平。
若出現異常（如峰分裂、信號漂移），需暫停運行并檢查流動相、離子源或柱狀態。
數據存儲
保存原始數據文件（如.RAW或.MS格式），確保實驗可追溯性。
六、數據分析與報告
色譜數據處理
根據保留時間、峰面積或峰高定量目標化合物，使用內標法或外標法繪制標準曲線。
質譜數據解析
通過分子離子峰（[M]+或[M]-）和碎片離子峰進行定性分析，結合數據庫（如NIST、HMDB）或文獻比對。
計算質量準確度（如誤差<5ppm）以驗證結果可靠性。
報告生成
整理樣品信息、實驗條件、定量結果及誤差分析，生成PDF或Word報告并存檔。
七、關機與維護
清洗系統
運行沖洗程序（如甲醇-水混合液），清洗色譜柱和流路，防止鹽或殘留物沉淀。
每周至少更換一次廢液瓶，清潔噴霧電極和離子源。
關機順序
先關閉質譜儀電源，再關閉UPLC泵和自動進樣器，最后關閉計算機和氣體供應。
若長期停機（超過一周），需保持質譜真空狀態，避免微生物污染。
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